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目前商场现售的绝大众半镁离子指示剂都是基于三羧酸-APTRA螯合剂,该螯合剂开头于四羧酸-BAPTA-钙离子螯合剂。它们搜罗mag-fura-2、mag-indo-1、mag-fluo-4和mag-rhod-3。固然它们都是为检测镁离子而计划的,但它们对钙的亲和力都高于镁。Mag-520 是**个对镁的亲和力高于钙的商用镁指示剂。与其他贸易镁离子指示剂(如风行的mag-fluo-4)比拟,其用于镁离子衡量的遴选性光鲜进步,而不受钙离子的作对。Mag-520 AM具有细胞排泄性,其光谱与FITC简直相像。金畔生物是AAT Bioquest的中邦署理商,为您供应上等的钙离子荧光探针Mag-520 AM。
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钙离子荧光探针Mag-Fluo-4 AM是美邦AAT Bioquest坐褥的钙离子荧光探针,细胞排泄性Mag-Fluo-4 AM是Fluo-4 AM的近似物,Mg离子的Kd为4.7 mM,Ca离子的Kd为22μM,以是可用作细胞内Mg离子指示剂以及 低亲和力Ca离子指示剂。 这种低亲和力荧光Ca离子指示剂已被用于精确跟踪骨骼肌中空间均匀逛离Ca离子瞬态的动力学。 Mag-fluo-4形成合于骨骼肌中空间均匀逛离Ca离子瞬态的牢靠动力学消息。金畔生物是AAT Bioquest的中邦署理商,为您供应*上等钙离子荧光探针Mag-Fluo-4 AM。
钙离子荧光探针Mag-Fluo-4 AM加载到活细胞中的计划(点击查看)
3.2正在合意的容器中夹杂16μL的Mag-Fluo-4AM。接下来,增加HHBS或您遴选的缓冲液,直到体积为3.2 mL。
留意:对待大众半细胞系,咱们提议Mag-Fluo-4 AM的*终浓度为4至5μM。
4.1该次序将染料劳动溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的*终浓度调理至5μM的Mag-Fluo-4 AM
7.用HHBS缓冲液或您遴选的缓冲液更换染料劳动溶液,利用1.0 mM Probenecid。
7.2正在相像的孔中出席200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您遴选的缓冲液)。
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